一、轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建原理與技術(shù)演進(jìn)

1. 受體人源化改造：突破種屬屏障

• 核心靶點(diǎn)：

• 人源SCARB2受體（hSCARB2） ：EV71和CA16病毒的關(guān)鍵細(xì)胞受體，在神經(jīng)元、肺泡細(xì)胞等中表達(dá)。

• 人源PSGL-1受體：介導(dǎo)EV71胃腸道感染，但無法支持神經(jīng)侵襲。

• 技術(shù)方法：

• 通過顯微注射將人源受體基因（如 hSCARB2）導(dǎo)入C57BL/6J或BALB/c小鼠受精卵，構(gòu)建穩(wěn)定遺傳品系。

• 啟動(dòng)子選擇：EF-1α啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)廣泛表達(dá)，或組織特異性啟動(dòng)子（如神經(jīng)元特異性）增強(qiáng)靶向性。

2. 免疫缺陷雜交模型：增強(qiáng)感染敏感性

• STAT1-KO × hSCARB2雙基因模型：

• 免疫缺陷（STAT1敲除）聯(lián)合受體表達(dá)，使2周齡小鼠對EV71臨床株的敏感性提高1000倍。

• 病毒滴度顯著降低（僅需常規(guī)劑量1/1000），適用于低毒力毒株研究。

二、模型特征與疾病模擬能力

1. 病理表型對比

注：所有模型均未模擬人類重癥標(biāo)志——神經(jīng)源性肺水腫。

2. 年齡依賴性與病毒適應(yīng)性

• hSCARB2模型：

• 新生鼠：皮下接種EV71（B4/B5亞型）出現(xiàn)典型皮疹和癱瘓。

• 成鼠（6周齡以上）：仍可被臨床株感染，但癥狀較輕。

• CA16特異性模型：

• hSCARB2鼠經(jīng)鼻腔感染CA16后，病毒在肺和腦中高效復(fù)制，誘發(fā)呼吸道與神經(jīng)bing變。

三、核心應(yīng)用場景

1. 致病機(jī)制研究

• 神經(jīng)侵襲路徑：EV71經(jīng)hSCARB2受體侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致神經(jīng)元壞死和癱瘓。

• 免疫病理機(jī)制：

• 感染后促炎因子（IL-6、TNF-α、CXCL10）顯著上調(diào)，T淋巴細(xì)胞浸潤驅(qū)動(dòng)組織損傷。

• PSGL-1模型揭示病毒在腸道免疫細(xì)胞中的早期復(fù)制。

2. 疫苗與藥物評(píng)價(jià)

• 疫苗保護(hù)效力：

• hSCARB2鼠接種滅活疫苗（FI-E59）后，可抵抗致死劑量EV71攻擊。

• 局限性：乳鼠模型僅能評(píng)價(jià)被動(dòng)免疫（母傳抗體），而hSCARB2成鼠支持主動(dòng)免疫研究。

• 抗病du藥物篩選：

• 單克隆抗體在PSGL-1模型中顯示100%保護(hù)率，但需在hSCARB2模型中驗(yàn)證神經(jīng)保護(hù)效果。

3. 多病原交互作用研究

• EV71+CA16雙感染：hSCARB2鼠為跨病原機(jī)制研究提供新平臺(tái)。