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簡要描述:細胞遷移實驗是正常細胞的基本功能之一,是機體正常生長發(fā)育的生理過程,也是活細胞普遍存在的一種運動形式。
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細胞遷移實驗是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央部分的細胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設定的時間是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。
Transwell的基本原理是將transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內稱為上室,培養(yǎng)板內稱為下室,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔,上室內添加上層培養(yǎng)液,下室內添加下層培養(yǎng)液。將細胞種在上室內,由于膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內的細胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。
細胞遷移實驗流程
1. 用marker筆在6孔板背后均勻得劃橫線;
2. 在孔中加入細胞;
3. 第二天用槍頭垂至于背后的橫線劃痕;
4. 用PBS洗去處劃下的細胞,培養(yǎng)不同時間,取樣,拍照;
5. 數(shù)據(jù)處理:每個時間點細胞整體遷移距離=每個時間點距離長度-0時距離;
6. 結果統(tǒng)計分析。
Transwell實驗
1. 采用未鋪 Matrigel 膠的 Transwell 小室用于實驗;
2. 制備細胞懸液;
3. 接種細胞;
4. 檢測穿過的細胞數(shù);
5. 結果統(tǒng)計分析。
客戶提供
細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞),所需藥品,藥物處理方式和濃度。
公司提供
基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結果、剩余藥品。
實驗周期:大約2-3周左右,具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內容而定。
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