實(shí)驗(yàn)方法原理

藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)動(dòng)物死亡率為50%時(shí)的單次給藥劑量，單位通常為mg/kg。例如，當(dāng)某藥物給予400mg劑量時(shí)，可致使一半家兔（體重約為4kg）死亡，則其LD50值為100mg/kg。LD50值

通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實(shí)驗(yàn)同屬于一般毒理學(xué)的研究范疇。此外，藥物毒理學(xué)研究尚包括特殊毒理學(xué)（致癌、致畸、致突變）、藥物依賴性及過(guò)敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)等。各種屬動(dòng)物均可用于藥物

LD50值的測(cè)定，通常使用嚙齒類動(dòng)物（大鼠和小鼠），有時(shí)使用家兔和犬。

（barbiturate）藥物可抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥及麻醉作用，當(dāng)劑量過(guò)大時(shí)可使生命中樞麻痹，最終導(dǎo)致死亡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)學(xué)習(xí)測(cè)定麻醉劑的LD50值，介紹了藥物急性毒性的研究方法。

實(shí)驗(yàn)材料

小鼠（昆明種） 雌雄各半

儀器、耗材

 麻醉劑溶液 生理鹽水量筒 燒杯 注射器 天平

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 預(yù)實(shí)驗(yàn)

隨機(jī)將小鼠分為4~5組，每組3~4只。配制3%麻醉原液，可進(jìn)一步稀釋為不同濃度藥液。小鼠腹腔注射給藥，各組給藥劑量按照等比數(shù)列遞減。記錄每組動(dòng)物的死亡率。目的在于找到并確定造成0%與100%動(dòng)物死

亡的劑量范圍。

2. 正式實(shí)驗(yàn)

（1）先將小鼠雌雄分開，逐一稱重。雌、雄小鼠分別按照體重由小到大（或由大到?。┡判?。然后按照分層隨機(jī)原則將小鼠分為5～7組，每組10只。

（2）根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)中造成0%與100%動(dòng)物死亡的劑量范圍，在其間設(shè)計(jì)5～7個(gè)不同劑量組，使劑量按照等比數(shù)列遞減。給藥后觀察并記錄動(dòng)物的死亡時(shí)間和數(shù)目。連續(xù)觀察7～14天。按照簡(jiǎn)化概率法、改進(jìn)寇氏法、Bliss法

（詳見參考書目）計(jì)算LD50值及其95%可信區(qū)間。

（3）計(jì)其方法（寇氏法）：

注意事項(xiàng)

1. 正式實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)中0%與100%動(dòng)物死亡的劑量范圍，按照等比數(shù)列設(shè)計(jì)5～7個(gè)不同劑量組，公比一般取1: 0.8 ～ 1: 0.7。

2. LD50值計(jì)算方法很多，其中Bliss法亦稱作加權(quán)幾率單位法或幾率單位正規(guī)法，是目前新藥審批中規(guī)定使用的方法?，F(xiàn)可通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算完成，如中國(guó)藥理學(xué)會(huì)數(shù)學(xué)藥理專業(yè)委員會(huì)編制的藥效學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件。

3. 若同時(shí)測(cè)定藥物的LD50值及ED50值（半數(shù)有效劑量），可計(jì)算藥物治療指數(shù)TI（therapeutic index），即TI= ED50/LD50。通常來(lái)說(shuō)，藥物治療指數(shù)越大，則越安全。